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倒置显微镜是一种把照明系统望于载物台的上方,把物镜置于载物台下方的显微镜。这种显微镜出于大大加长了载物台上放置样品的高度,使得可以放置培养皿、培养瓶等容器,因此能够观察活体细胞和组织,这一点对其他显微镜来说是无能为力的。

 

 

1.照明系统例置显微镜的照明系统是比较特别的,它借助于照明架和照明器座被固定在载物台上方,照明器座在照明架上的位置随着所使用的集光器类型而不同。照明器座上具有滤片槽,用于相差观察的相环楷和一个光闹,它的上面可以安装照明器,下面可以安装长工作距离集光器。倒置显微镜所使用的照明器一般为6V15W简式照明器或12v50w灯空,后者可以产生更强的照明光。两种照明器部具有调中螺旋,可以进行灯的调个。一般例置显微镜通常使用这种透射光照明器,但较为高级的倒置显微镜还配备有落射光照明器(图12.2)。这种照明器安装在朗台的后侧方,照明光线通过物镜由下方落射在标本上,我们可以借助标本的反射光而观察物体的表面结构及立体形状,因此更适于观察活体微生物、悬浮细胞,也适用于观察岩石、矿物、晶体标本及金属材料和部件的表面。

2.集光器

在倒置显微镜中经常使用的集光器有两种:

(1)长工作距离集光器。这种集光器可以直接旋入照明座下面,它使得集光器与载物台之间有较长的距离,可以放置培养瓶进行观察,它主要适用于用低倍物镜观察较大容器内的物体。使用这种类型的集光器时,照明器座上的光阑是作为孔径光阑而使用的,场深和显微镜像的反差可以用这个光阑来调节。

(2)系统策光器。这种集光器借助于一个集光器架安装在照明架的楔形道轨内,并且通过垂直调动旋钮可以上下移动聚焦,它的基部具有集光能力较低的集光器透镜,面具有不同孔径和工作距离的可更换策光船顶,并且有7L径光阴。使用这种集光器时采用柯勒照明法,照明器座上的光阔就作为视场光阑使用。当集光器正确放置时,一个清楚的光阑像就会在物体平面形成,从而可以按照视场的大小进行调节。

3.物镜

由于用例置显微镜观察的话体生物标本往往部是装在培养皿或培养瓶等玻璃容器内的,必须透过较厚的玻璃容器底进行观察,因此用于倒置显微镜的物镜必须有较长的自由工作距离(6.4一11mm),表13中列出了在倒置显微镜中常用的各种物镜及其性能和用途。

用倒置显微镜也可以观察具咨0.17mm厚盖玻片的一般组织切片和涂片,但必须把玻片倒放(即盖玻片向下)在物台上,在这种情况下一般的透射光物镜直至油浸物镜都可以使用。

在倒置显微镜中,它的光袖由于通过一系列棱镜被偏转了135°,因而使得如同一般的显微镜一样能够从向前倾斜45°的目镜筒上很方便地进行观察。在毛些类型的这种显微镜中是以横向位置进行操作的,因而操作比较零活和方便,左手握着后面的粗调和细调旋钮,右手驱动物台机械移动器的旋钮,或者直接移动装有样品的容器。

倒置显微镜可以装配备种附属装置做多种用途使用,例如进行暗视野观察、相差显微观察、落射光显微观察、荧光显微观察以及显微照相、测绘和投影。如果把例置显微镜放在自动恒温台上并盖上有机玻确保温罩(图12.3),就可以在恒温条件下对培养的话体组织和细脑进行铰长时间的定点动态现察和照相,还可以装上显微电影摄影机拍摄缩时电影,每隔一定的时间拍摄一格,这样把发生在校长时间内我们不易察觉的微观生命活动现象(如细胞分裂、生长、微生物的运动等过程)真实地记录下来,而在较短的时间内把这一过程再现在银幕上,为我们进行动态的生物学研究提供了绝妙的工具。